实验一氨基酸纸层析法
氨基酸纸层析法 实验一
一、实验目的1.了解氨基酸的分离2.掌握纸上层析的基本原理和操作方法
一、实验目的 1.了解氨基酸的分离 2. 掌握纸上层析的基本原理和操作方法
实验原理二、纸层析是以滤纸为情性支持物的分配层析。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，吸附一层水作为固定相，有机溶剂为流动相当有机相流经固定相时，氨基酸在两相间不断分配而得到分离溶质在滤纸上的移动速度用R值表示：R，=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离=X/Y溶剂前层析斑点原点在一定的条件下某种氨基酸的R,值是常数。R,值的大小与氨基酸的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关
二、实验原理 ⚫ 纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤维上的羟基具 有亲水性，吸附一层水作为固定相，有机溶剂为流动相。当有机 相流经固定相时，氨基酸在两相间不断分配而得到分离。 ⚫ 溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示： Rf =原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离= X/Y ⚫ 在一定的条件下某种氨基酸的Rf值是常数。 Rf值的大小与氨基酸 的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有 关
三实验器材（1）层析缸：两组一台（2）毛细管：每瓶专用，切勿混用。（3）层析滤纸：1张/组。（4）直尺、铅笔：自备
三、实验器材 （1）层析缸：两组一台 （2）毛细管 :每瓶专用，切勿混用。 （3）层析滤纸：1张/组。 （4）直尺、铅笔：自备
四、实验试剂1.展层剂正丁醇：80%甲酸：水=15：3:2，充分摇匀。2.样品液用水配成每m含有赖氨酸、谷氨酸、氨酸各0.5%的氨基酸溶液，以及上述三种氨基酸的混合液（0.5%）。3.显色剂0.5g节三酮溶于100mL丙酮
四、实验试剂 1. 展层剂 正丁醇:80%甲酸:水=15:3:2，充分摇匀。 2. 样品液 用水配成每ml含有赖氨酸、谷氨酸、缬氨酸各0.5%的氨基酸溶 液，以及上述三种氨基酸的混合液(0.5%)。 3. 显色剂 0.5g茚三酮溶于100mL丙酮