实验五氨基酸的分离鉴定纸层析法
氨基酸的分离鉴定纸层析法 实 验 五
一、实验目的掌握氨基酸纸上层析的方法和原理。学会分析未知样品的氨基酸成分。二、实验原理滤纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析,滤纸纤维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有机溶剂为流动相。有机相流经固定相支持物时,与固定相之间连续抽提,使物质在两相间不断分配而得到分离
一、实验目的 掌握氨基酸纸上层析的方法和原理,学会分析 未知样品的氨基酸成分。 二、实验原理 滤纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析,滤纸纤 维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有机溶 剂为流动相。有机相流经固定相支持物时,与固定相之间 连续抽提,使物质在两相间不断分配而得到分离
分配层析:利用不同的物质在两个互不相溶的溶液中的分配系数不同而得到分离的。溶质在固定相的浓度Cs分配系数α=溶质在流动相的浓度C一个物质在某溶剂系统中的分配系数,在一定的温度下是一个常数
分配层析:利用不同的物质在两个互不相溶的溶液中的 分配系数不同而得到分离的。 分配系数α= 溶质在固定相的浓度Cs 溶质在流动相的浓度CL 一个物质在某溶剂系统中的分配系数,在一定的温度 下是一个常数
原点到层析斑点中心的距离迁移率R=原点到溶剂前沿的距离R,值的主要决定因素是分配系数(α)。对于某一物质在一定条件下的α值是固定的。因此Rf值为其特征常数。Rf值的影响因素:物质结构,溶剂组成,pH值,温度
原点到层析斑点中心的距离 原点到溶剂前沿的距离 迁移率 Rf = 物质结构,溶剂组成,pH值,温度 Rf值的影响因素: R f 值的主要决定因素是分配系数(α)。 对于某一物质在一定条件下的α值是固定的。 因此R f值为其特征常数
三、试剂和器材1. 试剂(1)展开剂:正丁醇一乙酸一水(4:1:3,VM)(2)氨基酸溶液:0.5%的脯氨酸、缬氨酸、丝氨酸、酪氨酸、精氨酸溶液及它们的混合液。(3)显色剂:0.1%水合三酮乙醇溶液。2.器材层析缸、毛细管、电吹风
三、试剂和器材 1. 试剂 (1) 展开剂:正丁醇-乙酸-水(4:1:3,V/V) (2) 氨基酸溶液:0.5%的脯氨酸、缬氨酸、丝氨酸、 酪氨酸、精氨酸溶液及它们的混合液。 (3) 显色剂:0.1%水合茚三酮乙醇溶液。 2. 器材 层析缸、毛细管、电吹风